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已认证技术资料/正文
243 人阅读发布时间:2020-12-17 09:52
有种缘分叫命中注定,蛋白世界中,填料和柱子的缘分也是命中注定
实验室的小哥哥、小姐姐们,做蛋白纯化的时候,买预装柱,价格有点偏贵,今年实验经费紧张,老板要求买填料自己装,可是柱子那么多,要怎么选,怎么装呢!


别担心,小优又来为您解忧啦!
空柱选择也要考虑多种因素,看似很简单,实际操作也有很多细节需要注意的,那我们一起来看下吧!
空柱选择指南
1、选择与待装填料、耐压相匹配的空柱
选空柱时必须要考虑耐压范围、粒径、流速三个因素:
(1)耐压:填料的耐压值要小于空柱的耐压值。因为空柱和填料都有对应的耐压值,在选择过程中必须保证填料的最大操作压力小于空柱的耐压值,以避免填料在运行过程中损坏。
(2)粒径:填料的粒径需大于柱子的筛网直径,而且最好相差30um以上。
(3)流速:填料的流速对应压力需小于空柱的耐压值。
实验室常用层析空柱及特点如下:

2、根据待装填料体积,选择相应空柱的规格
不同类型不同规格的空柱能够装载的填料体积也不一样,我们需先确定需要装多少填料,然后再选择空柱,值得注意的是,由于这些空柱都带有一个适配器,所以它们的装填体积可以在一定范围内进行调节。

3、计算装柱胶悬液的终体积,选择合适的装柱器
装柱的时候,需要把填料制备成胶悬液,因此装柱的时候需要计算填料胶悬液体积。
(1)置换填料缓冲液中到装柱缓冲液中
(2)匀浆浓度建议在50%-75%之间


4、确认筛网尺寸与填料的粒径匹配,相应选择接头&筛网等配件
点击以下链接查看配件介绍
柱效测定
装柱之后需要测定柱效,以便不影响后续的实验。

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