上海优宁维生物科技股份有限公司代理商

19

手机商铺

qrcode
商家活跃:
产品热度:
  • NaN
  • 0
  • 0
  • 2
  • 2
代理商

上海优宁维生物科技股份有限公司

入驻年限:19

  • 联系人:

    上海总部

  • 所在地区:

    上海 浦东新区

  • 业务范围:

    试剂

  • 经营模式:

    代理商

在线沟通

技术资料/正文

优宁维转染全攻略(下)

301 人阅读发布时间:2021-06-08 13:28

2. 物理介导法:

电转染:也叫细胞电穿孔 (electroporation),在瞬间强大电场的作用下,溶液中细胞的细胞膜被破坏,通透性增高,带电的外源物质以类似电泳的方式进入细胞膜。电场使DNA等物质进入细胞膜后只能停止在细胞膜附近,随后细胞本身的机制可以允许这些物质到细胞核等处。传统转染方式很难转染原代细胞,这种情况下电转染就能够从根本上解决此问题,无论是原代细胞、干细胞、还是难转染细胞系,都可以重复出很高的转染效率。
技术资料图片1

 

热卖产品:

Lonza电转仪:

货号 名称 备注
AAB-1001 Nucleofector™ 2b Device 2b平台,低通量有效转染难以转染的细胞系和原代细胞,150+种优化方案使用广泛
AAF-1002B 4D-Nucleofector™ Core Unit 4D核心元件
AAF-1002X 4D-Nucleofector™ X Unit 4D X模块,各种细胞核转染含20ul电板条或100ul电极杯
AAF-1002Y 4D-Nucleofector™ Y Unit 4D Y模块,适用于贴壁原代细胞,尤其是神经元

爆款电转试剂盒:

货号 名称 适用仪器 适用细胞
V4XP-3024 P3 Primary Cell 4D X Kit L 4D-Nucleofector™系统X模块(100ul电极杯) 原代细胞如人T细胞,CD34或大鼠神经元等
V4XC-2024 SF Cell Line 4D X Kit L (24 RCT) 4D-Nucleofector™系统X模块(100ul电极杯) 难以转染的细胞系,如K-562,Neuro-2A或RAW264.7
VPA-1002 Human T Cell Nucleofector® Kit Nucleofector™ 2b平台 原代人T细胞
VCA-1003 Cell Line Nucleofector® Kit V Nucleofector™ 2b平台 HepG2,HL-60,Jurkat,K-562,MCF7,SH-SY5Y或THP-1等细胞系


3、生物介导法:

病毒介导法:对于上述几种方式都不能实现转染的细胞,可采用病毒转染。病毒介导法转染效率特别高,尤其是针对难以转染的原代细胞、活体细胞。病毒转染主要包括以下几个步骤:构建载体、包装提纯病毒以及感染靶细胞。
技术资料图片2

目前,腺病毒、逆转录病毒和慢病毒载体已广泛用于哺乳动物细胞体内外的转染实验中。以慢病毒为例,其包装系统由两部分组成,即包装成分和载体成分。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装细胞,即可在细胞上清中收获携带目的基因的复制缺陷型慢病毒载体颗粒。包装好的假病毒颗粒可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
 

不同病毒载体形式对比:
载体 转基因能力 滴度 可否扩增 效率/稳定性 主要应用 宿主反应性 生物安全等级要求
逆转录病毒 最大7kb 106-108IU/mL 低/稳定 体外、半体外的分裂细胞 低,具免疫原性有毒 BSL-II
慢病毒 最大7.5kb 106-1010IU/mL 中/高稳定 分裂/非分裂中细胞、体外及体内 低,具免疫原性有毒 BSL-II
腺病毒 最大4.5kb 1012-1013 GC/mL 可扩增 高/瞬时 体内广泛 低,具免疫原性有毒 BSL-I


热卖产品:

产品名称 产品应用
GIPZ Human/Mouse Lentiviral shRNA Clone 模拟microRNA设计的shRNA,高效低毒,保证沉默效率
Trans-Lentiviral shRNA Packaging kit 专为高效包装慢病毒设计,适用于第二代或第三代慢病毒载体,产生的病毒能够促进高效基因沉默
CCSB-Broad Lentiviral Expression Human Clone 可直接表达的慢病毒载体ORF基因克隆
Precision LentiORF Human Clone 可直接表达,带荧光标签的慢病毒载体ORF基因克隆
Trans-Lentiviral ORF Packaging System 专为高效包装慢病毒设计,适用于第二代或第三代慢病毒载体,产生的病毒能够促进高效基因过表达
资料格式:

ebe11d25cb194eeb9676f46a0a0077e0.jpg

查看详细文档

上一篇

L-ADCC体外检测方法学总结

下一篇

优宁维转染全攻略(上)

我的询价