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外泌体,带来革命变革的小不点(三)— 外泌体捕获分离

2376 人阅读发布时间:2017-08-14 09:37

 

         外泌体天然存在于体液中,在包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等体液中广泛分布,而且,所有培养的细胞类型均可分泌外泌体;但是,想要研究这个分布广泛的小不点可不是一件容易的事情,其中,最为困难的就是从体液或者细胞培养基中分离出高纯度的外泌体。今天,小优专题给您带来的就是外泌体研究的最关键步骤——外泌体捕获与分离这一部分的技术讲解与解决方案。

 
        外泌体分离的传统方法为差速超速离心法和密度梯度超速离心法等,差速超速离心法是目前外泌体提取最常用的方法。简单来说是将细胞培养液或体液等样本依次在300 g、2 000 g、10 000 g离心去除细胞碎片和大分子蛋白质,最后100 000 g离心得到外泌体。此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块,质量不好,由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。另一种常用的外泌体分离方法为密度梯度离心法,将样本和梯度材料一起超速离心,样品中的不同组分沉降到各自的等密度区,分为连续和不连续梯度离心法。用于密度梯度离心法的介质要求对细胞无毒,在高浓度时粘度不高且易将pH调至中性。实验中常用蔗糖密度梯度离心法,在离心法的基础上,预先将两种浓度蔗糖溶液(如2.5 M 和0.25 M)配成连续梯度体系置于超速离心管中,样本铺在蔗糖溶液上,100 000 g离心16 h,外泌体会沉降到等密度区(1.10~1.18 g/ml)。用此种方法分离到的外泌体纯度高,但是前期准备工作繁杂,耗时,产量少。而且,这两种传统方法都需要用到超速离心机,设备昂贵,耗时长,一次最多只能做6个样品,效率低,并且需要大量的样品才能得到足够多的外泌体。
 
       接下来小优就为您带来优宁维为您提供的高效外泌体捕获与分离技术,帮您远离枯燥乏味的超速离心,快速高效制备高质量的外泌体。话不多说,亮技术,上产品:
        首先闪亮登场的是简单的一步法分离外泌体,实验原理如下图:
一步法分离外泌体原理示意图
 
       该技术的优势有节省时间,小体积样本适用(可从100 μl血浆中分离出足量外泌体),无需超速离心和其他预富集方式,试剂方便储存于运输(4℃保存)等。相关产品见下表:
 
产品编号 产品名称 产品规格 样本类型

 M1001

ExoPure™ Reagent (Overall Exosome Isolation)

 5/10/20 T

 biological fluids

 M1002

 25/50 T

 cell media

 M1003

 25/50 T

 urine

       
        除了一步法分离外泌体的技术外,小优还为您提供免疫捕获法,包括免疫微球产品与免疫预制板产品。首先我们来看免疫微球捕获分离外泌体的技术原理:
 
免疫微球分离外泌体原理图
 
        免疫微球捕获分离外泌体的优势包括实验操作步骤简单快速,无需超速离心等其他预富集操作,支持小样本量,可以筛选特异细胞分泌的外泌体等。产品列表如下:
 
产品编号
产品名称
产品规格
珠子规格

 NBP2-49826

 M1030

 Overall Exosome Isolation 
 (Cell Media)

 10/20 Reactions

 0.4 μm

 NBP2-49828

 M1031

 Overall Exosome Isolation 
 (Cell Media)

 10/20 Reactions

 1 μm

 NBP2-49829

 M1032

 Tumor-Derived Exosome Isolation  (Biofluids)

 10/20 Reactions

 0.4 μm

 NBP2-49830

 M1033

 Tumor-Derived Exosome Isolation  (Biofluids)

 10/20 Reactions

 1 μm

 NBP2-49831

 M1034

 Overall Exosome Isolation 
 (Mouse biofluids)

 10/20 Reactions

 0.4 μm

 NBP2-49832

 M1035

 Overall Exosome Isolation 
 (Mouse biofluids)

 10/20 Reactions

 1 μm

 NBP2-49833

 M1036

 Overall Exosome Isolation 
 (Mouse cell media)

 10/20 Reactions

 0.4 μm

 NBP2-49834

 M1037

 Overall Exosome Isolation 
 (Mouse cell media)

 10/20 Reactions

 1 μm

 NBP2-49835

 M1038

  Overall Exosome Isolation 
  (Biofluids)

 10/20 Reactions

 0.4 μm

 NBP2-49836

 M1039

 Overall Exosome Isolation 
 (Biofluids)

 10/20 Reactions

 1 μm

免疫预制板捕获分离外泌体的原理如下图所示:
免疫预制板分离外泌体原理图
 
       其优势包括可以长保存(保质期2年),支持小样本量(可低至每孔100 μl样品量),无需超速离心等其他预富集操作,可分泌特异细胞分泌的外泌体,可在板上对捕获的外泌体进行核酸提取操作等。相关产品如下:
 
产品编号
产品名称
产品规格
显色方法

 NBP2-49802

 M1004-100-T

Overall Exosome Isolation from Biofluids

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49803

 M1005-100-W

 100 Assays

 Luminometric

 NBP2-49804

 M1006-100-B

 100 Assays

 Fluorometric

 NBP2-49805

 1007-100-T

Overall Exosome Isolation from Serum

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49806

 M1008-100-W

 100 Assays

 Luminometric

 NBP2-49807

 M1009-100-B

 100 Assays

 Fluorometric

 NBP2-49808

 M1010-100-T

 M1013-100-T

Overall Exosome Isolation from Saliva

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49809

 M1011-100-W

 M1014-100-W

 100 Assays

 Luminometric

 NBP2-49810

 M1012-100-B

 M1015-100-B

 100 Assays

Fluorometric

 NBP2-49811

Overall Exosome Isolation from Cell Media

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49812

 100 Assays

 Luminometric

 NBP2-49813

 100 Assays

 Fluorometric

 NBP2-49814

 M1016-100-T

Tumor-derived Exosome Isolation from Plasma

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49815

 M1017-100-W

 100 Assays

 Luminometric

 NBP2-49816

 M1018-100-B

 100 Assays

 Fluorometric

NBP2-49800

M1019-100-T

Neural-derived Exosome Isolation from Plasma

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49817

 M1020-100-W

 100 Assays

 Luminometric

 NBP2-49818

 M1021-100-B

 100 Assays

Fluorometric

 NBP2-49819

 M1022-100-T

Glial-derived Exosome Isolation from Plasma

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49820

 M1023-100-W

 100 Assays

Luminometric

 NBP2-49821

 M1024-100-B

 100 Assays

Fluorometric

 NBP2-49822

 M1025-100-T

Monocytes/Platelet-derived Exosome Isolation from Plasma

 100 Assays

 Colorimetric

 NBP2-49823

 M1026-100-W

 100 Assays

 Luminometric

 NBP2-49824

 M1027-100-B

 100 Assays

 Fluorometric

        相信这么多优秀的捕获分离外泌体的产品,肯定有适合您的。同时,优宁维还为您提供优质专业的实验室技术服务,助力科研,让您外泌体研究无忧。
 
欲获得更多的信息和帮助,您可以通过以下方式联系优宁维。

 

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