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已认证公司新闻/正文
521 人阅读发布时间:2021-09-15 10:02
病毒双链RNA检测试剂盒
许多病毒会在基因组复制过程中产生的双链RNA (dsRNA)。检测病毒感染的传统方式依赖于病毒颗粒滴度法(空斑试验),此方法十分冗长,通常需要花费几天的时间。但是HTRF技术检测细胞裂解液中病毒复制活动中产生的dsRNA,实验当天就能获得实验结果。
实验原理
利用两种抗体检测dsRNA,抗体分别被标记了Eu供体和d2受体。基于HTRF技术,当两种染料靠近时,利用光源刺激供体,会发生荧光共振能量转移(FRET)至受体上,使其在特定波长(665nm)出发出荧光。这两种抗体与样本中的dsRNA结合,从而产生FRET。信号强度与dsRNA浓度成正比。
实验流程
采用384孔小体积微孔板或96孔浅孔板(终体积20 µL)的检测方案如下图所展示。10µL的细胞裂解液或对照液直接加入检测板中,再加入HTRF试剂进行检测即可。HTRF 供体和受体标记的抗体可以预先混合再进行添加,进一步的简化实验流程。只要按比例调整每种试剂的添加量,就可以在普通96孔或者384孔中进行实验。
标准曲线
该数据不能代替在实验室中获得的数据,只能作为例子来考虑。不同的酶标仪可能会获得不同的结果。
以4参数(4PL 1/Y²)模型拟合标准曲线:
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