818特惠！爱必信ChIP试剂盒助力科研新突破，限时抢购享低价！

染色质免疫共沉淀（ChIP）

随着研究的不断深入，染色质免疫共沉淀（ChIP）技术作为研究DNA与蛋白质相互作用的关键方法，逐渐受到关注。该技术通过在细胞核内对DNA-蛋白质复合物进行交联固定，利用特异性抗体对目标蛋白质进行免疫沉淀，从而分离出与该蛋白质相互作用的DNA片段，极大地推动了相关研究进展。传统上，人们已经认识到基因-蛋白质相互作用在DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等细胞生命活动中的关键作用，许多生理学家都对这种现象的发生过程进行了深入探索。如今，许多医学研究者将目光聚焦于基因-蛋白相互作用，期望在这一水平上另辟蹊径，深入分析癌症、心血管疾病、中枢神经系统紊乱等疾病的主要代谢通路和发生机制。研究人员希望通过掌握ChIP等实验技术，从组蛋白修饰、转录调控、凋亡等角度深入研究病变机制，进而开发出相应的药物。

从蛋白质的角度来看，能够与 DNA 结合的蛋白主要分为组蛋白和非组蛋白这两大类。组蛋白是染色体的重要组成成分，它能与 DNA 紧密结合形成核小体结构，这种结合关系相对稳定且固定存在，所以组蛋白的修饰作用具有重要的研究价值。NaCl 可以解除组蛋白和 DNA 之间的交联关系。而非组蛋白则主要包括参与 DNA 复制、mRNA 转录等功能蛋白，如解链酶、切割酶、转录激活蛋白等，它们与 DNA、mRNA 的结合较为瞬时，完成特定作用后就会及时脱离。

在活细胞状态下，ChIP 实验通过甲醛固定 DNA - 蛋白质复合物，利用微球菌核酸酶随机切断 DNA，形成一定长度范围内的染色质小片段。随后，基于抗原 - 抗体特异性结合反应，富集、沉淀这些小片段，再通过 NaCl、蛋白酶 K 处理解除蛋白质和 DNA 的交联，分离蛋白并纯化 DNA，最后采用 PCR 检测 DNA 序列信息，获取更多有价值的数据。

从上述原理可以明确，ChIP 实验步骤主要包括以下关键环节：

1. 1% 甲醛处理，促使蛋白质与 DNA 交联；

2. 细胞裂解，运用微球菌核酸酶消化形成染色质小片段；

3. 进行抗原 - 抗体反应，驱动免疫沉淀反应；

4. 利用 NaCl、蛋白酶 K 处理，解除 DNA - 蛋白交联；

5. 对 DNA 进行纯化回收；

6. 运用 1.8% 琼脂糖凝胶电泳、RT - PCR 对 DNA 作更深入的分析。

在开展 ChIP 实验时，为确保结果的可靠性与准确性，需关注以下要点，并通过设置全面的对照组来把控实验流程，具体如下：

实验材料准备

1，细胞数量控制 ：在开展 ChIP 实验前，务必精准计数活细胞。投入实验的细胞数量过高，会使甲醛交联时间被迫延长，同时细胞数量与微球菌核酸酶的比例失衡增大，导致裂解后的 DNA 小片段过长（超出 1000bp）。此类过长片段在后续实验步骤中易丢失，给 PCR 检测带来极大困难，甚至导致实验失败。而细胞数量不足，则会使细胞数量与微球菌核酸酶的比例过小，致使 DNA 片段长度小于 100bp。鉴于不同实验对象和目的的差异，DNA - 蛋白的丰度不尽相同，因此并无统一的细胞数量标准。为确定适宜的细胞用量，预实验必不可少，需经多次摸索以找到最佳细胞数量。

2，甲醛交联时间把控 ：建议采用 1%终浓度的甲醛进行交联，时间控制在 5 - 60 分钟范围内。若交联时间过长，会引发 DNA 小片段过度延伸，长度超出 1000bp；而交联时间过短，则交联反应不充分，致使部分 DNA - 蛋白质复合物在实验过程中分离，最终所得数据的准确性大打折扣。

实验对照设置

3，内对照 Input DNA ：在染色质断裂环节，务必按比例预留部分染色质溶液作为 Input DNA，它是 ChIP 实验的内对照。借助 Input DNA，可直观评估染色质断裂成效。进一步地，依据取样比例，结合 Input DNA 与染色质沉淀中靶序列的含量，还能推算出 ChIP 实验的效率，因而设置 Input 内对照十分关键。

4，阳性抗体对照 ：当目的抗体沉淀 DNA - 蛋白复合物时，必须同步设置阳性抗体对照组。阳性抗体一般选取能与已知保守序列特异性结合的蛋白抗体，且该蛋白在各物种间高度保守，组蛋白抗体是常用的阳性对照选择。

5，阴性抗体对照 ：在目的抗体沉淀蛋白 - DNA 复合物时，设置阴性抗体对照组不可或缺。阴性对照抗体可选用与目的蛋白抗体同源的血清蛋白，以此排除非特异性结合等因素对实验结果的干扰。

试剂与操作细节

6，目标蛋白抗体选择与使用 ：ChIP 实验中抗原 - 抗体免疫反应有其特殊性。常规的 western blot、蛋白质免疫共沉淀等实验中，只要抗原存在与抗体结合的位点，空间结构对免疫反应影响较小。然而在 ChIP 实验里，染色质沉淀阶段蛋白与 DNA 处于交联状态，目标蛋白的结合位点可能发生空间构象变化，阻碍抗体结合。这意味着能用于 western blot、蛋白质免疫共沉淀的抗体，并不一定适用于 ChIP 实验。务必选用经过 ChIP 验证的抗体，否则实验易失败。此外，抗体的浓度、孵育时间及温度需依据目标蛋白丰度灵活调整。若目标蛋白丰度较低，可适当增加活细胞数量，或延长孵育时间至过夜（4℃条件下），以优化实验条件，提高检测灵敏度。

7，常规操作规范 ：ChIP 实验流程较长且复杂，包含反复的洗柱、离心、吸液、换管、孵育、震荡等操作步骤。每一步操作看似简单，但都要求精准、细致，对实验人员的基本功是极大的考验。在实验过程中，务必保持专注，严谨操作，避免因人为失误引入误差，确保实验的顺利进行与结果的可靠性。

在 ChIP 实验中，实验人员需对上述要点给予充分重视，并通过严谨的实验设计与规范操作，最大限度地减少实验误差，提高实验的成功率与数据的可信度，从而为深入探究 DNA 与蛋白质相互作用提供坚实保障。

染色质免疫共沉淀（ChIP）试剂盒（货号：abs50034），为研究 DNA 与蛋白质相互作用提供了高效、可靠的工具。该试剂盒包含进行22次ChIP实验所需的全部试剂组分，如蛋白A/G磁珠、多种缓冲液、细胞裂解缓冲液、细胞核裂解缓冲液、ChIP洗脱缓冲液、蛋白酶K等，以及对照抗体和引物，确保实验顺利进行。

产品优势

组分齐全 ：无需额外购置其他试剂，方便快捷，节省时间和精力。

操作简便 ：详细的操作说明书和优化的实验流程，使实验步骤一目了然，即使新手也能轻松上手。

高效可靠 ：试剂盒中的抗体和磁珠等组分经过严格筛选和质量控制，保证了实验的高特异性和高灵敏度，能够有效富集目标DNA片段，提供可靠的实验结果。

应用领域

ChIP技术在基因表达调控研究中发挥着关键作用，可用于分析转录因子与DNA的结合、组蛋白修饰与基因表达的关系等。借助该试剂盒，科研人员能够深入探讨疾病发生机制、药物作用靶点等重要科学问题。

818 惊爆价活动

正值818促销活动期间，原价4000元的ChIP试剂盒，现惊爆价仅需2888元！这是实验室补充试剂、开展相关研究的时机，不容错过！

保存与售后

试剂盒中的各组分应按照说明书的要求，在2-8℃或-20℃条件下妥善保存，以确保试剂的稳定性和实验效果。同时，爱必信公司提供优质售后支持，如有任何问题，可随时联系其专业团队获取帮助。

把握818活动的优惠机会，选择爱必信ChIP试剂盒，助力科研工作迈向新台阶，深入探索DNA与蛋白质相互作用的奥秘，为生命科学研究贡献力量！

818U多多2周年庆，科研好礼等你拿

科研之路，探索无止境。为助力科研人员在追求科学真理的道路上不断前行，优宁维（univ）商城特别推出 818U 多多 2 周年庆活动。活动期间，海量科研试剂和耗材惊喜促销，优惠力度空前。

818U多多2周年庆-优宁维（univ）商城 现正火热进行中，众多热门产品限时折扣、满减优惠、买赠活动等你来。还在等什么？赶紧点击链接，开启您的科研采购狂欢之旅吧！