T 细胞激活：免疫应答的启动关键

CellXViva Human T cell Activation Kit

在免疫学的研究中，T 细胞激活是启动特异性免疫应答的关键步骤。T 细胞在识别抗原呈递细胞（APC）呈递的抗原后，在共刺激信号的作用下被激活，进而增殖、分化为效应 T 细胞和记忆 T 细胞，执行免疫功能。这一过程涉及到多个关键分子的相互作用，其中 CD3 和 CD28 是 T 细胞激活的主要信号分子。CD3 复合体与 T 细胞受体（TCR）结合，识别特异性抗原，而 CD28 分子则通过与 APC 细胞表面的 B7 家族分子结合，提供共刺激信号。此外，白细胞介素 - 2（IL - 2）在 T 细胞激活后由 T 细胞自身分泌，进一步促进 T 细胞的增殖和存活。

CellXViva Human T cell Activation Kit：精准激活人 T 细胞的科研利器

在众多 T 细胞激活工具中，CellXViva Human T cell Activation Kit 凭借其科学的设计和高效能的组分，为科研工作者提供了一个精准模拟人 T 细胞激活过程的解决方案。

该试剂盒包含以下关键组分：

其操作步骤如下：

方案 1：抗人 CD3 单克隆抗体固定方法

1,将 NA/LE 小鼠抗人 CD3 单克隆抗体稀释至 PBS 中，最终浓度为 5µg/mL。

2,将稀释后的抗体按每孔 1mL 加入 24 孔板中固定。

3,在 37°C、5% CO₂ 条件下孵育 2 小时，或在 4°C 下孵育过夜。

4,移除抗体，准备人外周血单个核细胞（PBMC）的单细胞悬液，重悬于完全培养基中，浓度为 (1 - 3)×10⁶ 细胞 /mL。

5,在 V 型管中准备完全补充的 T 细胞培养基，加入 5µg/mL NA/LE 小鼠抗人 CD28 单克隆抗体和 10ng/mL 人 IL - 2 蛋白。

6,转移细胞至培养板，37°C、5% CO₂ 孵育 2 天。

7,检查细胞健康状况后，离心、洗涤细胞，重悬于 0.5mL 1% BSA 中，计数并检测细胞活性（>95%）。

8,用 10µg 人 IgG 抗体阻断细胞，冰浴 30 分钟。

9,加入 Brillia Violet 421™ 抗人 CD25 抗体和 Alexa Fluor® 488 抗人 CD69 抗体，4°C 孵育 30 分钟。

10,离心、洗涤细胞后，重悬于 200µl PBS 中，用于流式细胞术分析。

方案 2：抗人 CD3 单克隆抗体游离方法

1,准备 PBMC 单细胞悬液，重悬于完全培养基，浓度为 (1 - 3)×10⁶ 细胞 /mL。

2,在 V 型管中加入 5µg/mL NA/LE 小鼠抗人 CD3 和 CD28 单克隆抗体及 10ng/mL 人 IL - 2 蛋白。

3,转移细胞至培养板，37°C、5% CO₂ 孵育 2 天。

4,后续步骤同方案 1 中的步骤 5 - 10。

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