RNA 免疫共沉淀（RIP）：解析 RNA - 蛋白互作的实用技术

RNA 免疫共沉淀（RIP）试剂盒

在分子生物学研究中，RNA 与蛋白质的相互作用是揭示基因表达调控、细胞功能机制的关键一环。而 RNA 免疫共沉淀（RIP）技术，正是解析这种互作关系的常用核心方法之一。

一、RIP 技术：是什么，能做什么？

RNA 免疫共沉淀（RIP）是一种基于免疫沉淀原理的实验技术，核心目的是捕获细胞内与目标蛋白结合的 RNA 分子，进而分析这些 RNA 的种类与功能 —— 它是研究 RNA 结合蛋白（RBP）靶标、lncRNA/miRNA 与蛋白互作的核心工具之一。

它的实验原理清晰直接：

1，裂解细胞，释放细胞内天然存在的 RNA - 蛋白复合物；

2，用目标蛋白的特异性抗体，结合对应的蛋白（连带结合在蛋白上的 RNA）；

3，分离复合物后，消化蛋白、纯化 RNA，最终通过测序、qPCR 等方法分析 RNA 信息。

如图 ：RIP 实验原理所示

二、RIP 实验的核心流程

标准 RIP 实验的操作步骤简洁易上手，主要分为 5 步：

1，细胞培养：获得足量实验细胞；

2，细胞裂解：裂解细胞释放 RNA - 蛋白复合物；

3，IP 步骤：磁珠与特异性抗体结合，捕获目标蛋白 - RNA 复合物；

4，洗涤：去除非特异性结合的杂质；

5，洗脱：得到纯化的蛋白 - RNA 复合物。

如图 ：RIP 实验流程示意图

三、RIP 实验的关键：对照与结果验证

要保证实验结果可靠，对照设置和结果验证是核心：

对照需包含 “Input 组”（裂解液的一部分，作为实验基准）和 “IgG 对照组”（非特异性抗体，排除非特异结合干扰），完整的对照流程能有效避免假阳性。

如图 ：RIP 对照实验设置流程图

RIP 实验后 WB 验证结果

结果验证可通过 WB 检测目标蛋白的富集情况（如图 ：RIP 实验后 WB 验证结果），同时对沉淀的 RNA 做 qPCR / 测序分析，实现 “蛋白 + RNA” 的双重验证。

四、优宁维 abs50071 RIP 试剂盒：你的 RIP 实验好帮手

如果你正在开展 RNA - 蛋白互作研究，优宁维自主品牌的RNA 免疫共沉淀（RIP）试剂盒（货号：abs50071） 可直接匹配你的实验需求：

这款试剂盒优化了实验流程，配套了细胞裂解液、磁珠、阴性对照 IgG 等核心试剂，无需额外繁琐准备；同时兼顾对照设置的操作指导，能助力你获得稳定可靠的实验结果（如上述 WB 验证结果所示）。

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关于 RIP 试剂盒的常见问题（FAQ）

1，RIP 试剂盒适合哪些研究场景？

答：适用于检测细胞内特定蛋白与 RNA 的结合情况，常用于 lncRNA/miRNA - 蛋白互作、RNA 结合蛋白（RBP）靶 RNA 筛选等分子生物学研究。

2，abs50071 RIP 试剂盒包含哪些试剂？

答：试剂盒覆盖 RIP 实验全流程，包含细胞裂解液、磁珠、阴性对照 IgG、洗涤缓冲液等核心试剂。

3，如何确认 RIP 实验是否成功？

答：可通过 WB 检测目标蛋白的富集程度，同时对沉淀的 RNA 做 qPCR / 测序分析，确认 RNA 的特异性结合