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爱必信 Trizol 总 RNA 提取试剂 实验操作与全流程方案

324 人阅读发布时间:2026-02-06 11:19

总 RNA 提取是分子生物学基因表达分析、cDNA 合成、荧光定量 PCR(qPCR)等实验的核心起始步骤,RNA 的完整性与纯度直接决定下游实验结果的可靠性。爱必信 Trizol(货号:abs60154)作为经典广谱型 RNA 提取试剂,凭借高效裂解、强效 RNase 抑制的特性,成为实验室 RNA 提取的标准化选择。

一、爱必信 Trizol(abs60154)核心优势

1,样本适配广:兼容动物 / 植物组织、贴壁 / 悬浮细胞、细菌、酵母等多种样本类型

2,提取效率高:快速裂解样本并解离核酸 - 蛋白复合物,RNA 得率稳定

3,防降解能力强:有效抑制内 / 外源性 RNase,保障 RNA 完整性

4,纯度把控优:分层分离清晰,降低 DNA、蛋白、多糖污染风险

5,学术认可度高:累计被 170 篇科研文献引用,实验结果可复现性强

6,下游适配全:提取的 RNA 可直接用于逆转录、qPCR、高通量测序等实验

二、爱必信 Trizol 标准提取操作流程

(一)样本前处理

组织样本:取 50-100mg 组织,液氮研磨后加入 1ml 爱必信 Trizol,涡旋混匀;富含多糖 / 脂肪的样本裂解后,4℃、12000×g 离心 10min,取上清备用。

贴壁细胞:按培养面积添加 Trizol(10cm² 加 1ml),吹打裂解后转移至离心管,无需洗涤细胞。

悬浮细胞:离心收集细胞,每 5-10×10⁶细胞加 1ml Trizol 吹打裂解,避免洗涤导致 RNA 降解。

(二)液相分离

裂解产物室温静置 5min,完成核酸 - 蛋白复合物解离

每 1ml Trizol 加入 0.2ml ,剧烈振荡 15s,室温静置 2-3min

4℃、12000×g 离心 15min,吸取上层水相(体积约为 Trizol 的 60%),勿触碰中间层

(三)RNA 回收与保存

加入 0.5ml 异丙醇沉淀 RNA,室温静置 10min 后离心弃上清

用 75% 乙醇洗涤沉淀,离心后弃上清,室温倒置晾干

DEPC 水溶解 RNA,通过电泳与紫外分光光度计检测质量

分装后 - 80℃保存,避免反复冻融

三、实验关键注意事项

1,全程使用无 RNase 耗材,离心管、枪头可经 180℃烘烤或 DEPC 水浸泡处理

2,操作时佩戴手套、口罩,防止外源 RNase 污染样本

3,未及时提取的样本,需加入爱必信 Trizol 裂解后再冻存,减少冻融降解

4,Trizol 含成分,操作时做好防护,皮肤接触后立即用大量清水冲洗

5,RNA 纯度检测需使用专用定量缓冲液,保证 A260/A280 比值准确

四、RNA 表达实验配套试剂方案

爱必信 Trizol 搭配旗下逆转录、qPCR 试剂,可形成提取 - 逆转录 - 定量全流程实验闭环,保障实验连贯性与结果稳定性:

 
货号
产品名称
核心应用场景
abs60246
逆转录一管化三代预混液
真 / 原核 RNA cDNA 合成
abs601510
含去基因组 cDNA 合成预混液
需去除 gDNA 的逆转录实验
abs60087
SYBR Advanced qPCR 预混液
荧光定量 PCR 精准检测
 

五、优宁维专属推广活动

优宁维作为爱必信官方授权合作伙伴,现推出爱必信 Trizol 及配套试剂专属采购活动

1,爱必信 Trizol(abs60154)现货供应,活动期间订购享专属折扣

2,组合订购 Trizol + 逆转录 /qPCR 试剂,加赠无酶实验耗材

3,优宁维技术团队免费提供 RNA 提取、qPCR 实验方案优化咨询

六、常见问题 FAQ

Q1:爱必信 Trizol 提取的 RNA 出现 DNA 污染怎么办?

A:液相分离时严格吸取上层水相,避免吸入中间层 DNA;下游实验可搭配爱必信 abs601510 去基因组逆转录试剂,进一步清除残留 gDNA。

Q2:RNA 提取后降解严重,如何排查原因?

A:①耗材未彻底去 RNase,更换无酶认证耗材;②样本冻融次数过多,建议样本裂解后再冻存;③操作耗时过长,全程冰上操作并简化流程。

Q3:爱必信 Trizol 提取植物组织 RNA 需要额外优化吗?

A:植物样本含多糖多酚,匀浆后需离心去除不溶物;可适当增加抽提次数,提升 RNA 纯度。

Q4:提取的 RNA 可用于哪些下游高通量实验?

A:爱必信 Trizol 提取的 RNA 完整性达标,可直接用于转录组测序、基因芯片、Northern 杂交等对核酸质量要求较高的实验。

 

名称 货号 规格
逆转录一管化三代预混液 abs60246-100T 100T
First-strand cDNA Synthesis Mix With gDNA Remover abs601510-50T 50T
SYBR Advanced qPCR SuperMix Kit abs60087-500T 500T

 

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