小鼠胰腺组织如何高效解离？

在胰腺相关研究中，无论是做免疫分析、单细胞测序，还是原代培养，都绕不开一个关键步骤：

将完整的胰腺组织转化为高质量的单细胞悬液

但实际操作中，很多实验人员都会遇到：

细胞得率低，活率不稳定，流式结果杂乱

这往往和“解离过程”密切相关。

一、为什么胰腺组织解离难？

相比脾脏或淋巴结，胰腺组织有几个典型特点：

消化酶丰富（如胰蛋白酶） → 容易自我降解

结构复杂 → 外分泌腺泡 + 内分泌胰岛混合

结缔组织较多 → 增加解离难度

这意味着：既要“解开组织”，又要“保护细胞”。

二、理想的组织解离需要满足什么？

一个好的解离体系通常要兼顾三点：

1，温和性：减少细胞损伤

2，效率：充分释放细胞

3，稳定性：实验重复性高,

否则很容易出现：

单细胞比例低，双ts或聚团多，表面抗原丢失

三、胰腺组织解离的基本流程

一个标准的小鼠胰腺解离流程一般包括以下步骤：

组织获取与清洗

取出胰腺组织，PBS清洗去除血液与脂肪

组织剪碎 + 酶解

将组织剪成小块（约1 mm³），加入解离液，37℃摇床孵育

关键点：

组织越小 → 酶接触更充分，温度和时间 → 直接影响活率

机械分散 + 过滤

轻柔吹打

70 μm滤网过滤

目的是获得均一单细胞悬液

离心与洗涤

去除上清，PBS洗涤，必要时进行红细胞裂解

质量评估（流式检测）

通常通过流式细胞术评估：

单细胞比例，活细胞比例，细胞群分布

图1：流式细胞分析结果（单细胞率与活率）

从结果可以看到：

单细胞比例较高（Single Cells），活细胞比例良好（Live）

说明解离过程对细胞损伤较小

四、实验中常见问题

很多实验失败，其实并不是“技术问题”，而是出在解离环节：

酶配比不合理，批次差异大，操作时间不稳定

这也是为什么越来越多实验室开始使用标准化试剂体系。

五、更稳定的解决方案思路

以实际应用为例：

爱必信 小鼠胰腺组织解离试剂盒（abs50096）

其核心思路是：

1，多酶组合 → 提升解离效率

2，温和体系 → 保护细胞表面抗原

3，标准化 → 提高实验重复性

适用于：

原代细胞培养，流式细胞分选，单细胞测序，药物筛选

产品详情：小鼠胰腺组织解离试剂盒_Absin_优宁维(univ)商城

六、总结

胰腺组织解离的本质在于平衡两点：

“充分解离” vs “保护细胞”

当解离体系稳定后：

数据更可靠，实验更可重复，下游分析更顺畅

FAQ（常见问题）

Q1：胰腺组织解离后细胞活率低怎么办？

常见原因：

消化时间过长，操作过于剧烈，温度控制不当

建议缩短消化时间或优化解离体系。

Q2：为什么要用70 μm筛网？

用于去除未消化组织块，避免：

流式堵管，数据异常

Q3：红细胞裂解是必须的吗？

不是必须步骤，但在血液残留较多时建议使用，否则会影响检测准确性。

Q4：解离后的细胞可以直接做单细胞测序吗？

可以，但建议：

活率 >85%，单细胞比例高，无明显碎片