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可固定死细胞标记试剂盒620(适用于流式)
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如何快速区分活细胞与死细胞?理解双染技术的原理与应用

50 人阅读发布时间:2026-04-24 11:35

在细胞生物学研究中,准确判断细胞活性是很多实验的基础。无论是药物筛选、毒性评价,还是细胞培养状态监测,研究人员都需要一种直观、稳定的方法区分活细胞与死细胞。

为什么细胞活死检测不能只看形态?

细胞状态变化往往早于形态变化。部分细胞看起来仍然完整,但膜完整性或代谢活性已经下降。 因此,仅依靠显微镜下的形态观察,很难准确判断细胞真实状态。

更可靠的方式,是同时结合细胞膜完整性与细胞内酶活性进行判断。 Calcein-AM/PI 双染正是基于这一思路建立的经典检测方法。

 

新闻图片1

双染技术如何同时识别活细胞和死细胞?

Calcein-AM:标记活细胞

Calcein-AM 可进入活细胞,被细胞内酯酶水解后形成 Calcein,并滞留在细胞内, 发出明亮的绿色荧光。

激发波长:490 nm;发射波长:515 nm。

PI:标记死细胞

PI 不能穿过完整细胞膜,只能进入膜受损的死细胞,并与 DNA 结合产生红色荧光。

激发波长:535 nm;发射波长:617 nm。

两者联合使用时,活细胞呈绿色荧光,死细胞呈红色荧光。 在 490 nm 激发下,可同时观察活细胞与死细胞;在 545 nm 激发下,则更适合观察死细胞信号。

哪些实验场景适合使用 Calcein-AM/PI 双染?

该方法操作直观,结果易于观察,适合用于细胞活性分析、药物毒性检测、实验条件优化以及荧光显微镜观察等场景。 对于需要快速判断细胞状态的实验,双染结果通常比单一染色更清晰。

产品推荐:爱必信 Calcein-AM/PI 活细胞/死细胞双染试剂盒

优宁维旗下爱必信 Calcein-AM/PI 活细胞/死细胞双染试剂盒(货号:abs50056), 采用 Calcein-AM 与 PI 双重染料体系,可用于活细胞和死细胞的同步染色分析。

  • 产品规格:500T
  • 组分包含:Calcein-AM Solution、PI Solution、10× Assay Buffer
  • 单次检测:适用于 200 μL 细胞悬液染色
  • 检测方式:荧光显微镜或荧光酶标仪
  • 保存条件:-20℃ 避光干燥保存

产品链接:

实验提示: Calcein-AM 对湿度和反复冻融较敏感,建议首次使用后按单次用量分装保存。 染色工作液需现配现用,并建议当天用完,以保证染色效果稳定。

FAQ 常见问题

Q1:Calcein-AM 和 PI 可以单独使用吗?

可以。Calcein-AM 主要用于标记活细胞,PI 主要用于标记死细胞。 但双染可以在同一样本中同时区分两类细胞,结果更直观。

Q2:染色后绿色信号弱是什么原因?

可能与 Calcein-AM 降解、细胞状态不佳、染色浓度偏低或孵育时间不足有关。 建议检查试剂保存条件,并根据细胞类型优化浓度。

Q3:为什么有些细胞同时出现红色和绿色?

这可能说明细胞处于损伤或死亡过渡阶段,膜完整性已经下降,但仍存在一定酯酶活性。

Q4:染色时间越长效果越好吗?

不是。通常 37℃孵育 15 分钟即可,必要时可延长至 30 分钟。 时间过长可能增加背景信号。

Q5:这个试剂盒适合哪些研究方向?

适用于药物筛选、细胞毒性评价、细胞活性分析、体外实验条件优化等科研场景。

【免责声明】本篇文章来源于网络公开信息,由AI生成,若不慎涉嫌侵权,请及时联系,我们将第一时间配合处理,不承担任何法律责任。

 

名称 货号 规格
小鼠心脏组织解离试剂盒 abs50094-10T 10T
Calcein-AM/PI 活细胞/死细胞双染试剂盒 abs50056-500T 500T
人间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒 abs9454-1kit 1kit

 

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