G‑蛋白偶联受体(GPCR)是药物研发最重要靶点家族之一,cAMP作为GPCR通路核心第二信使,胞内浓度变化直接反映Gs/Gi受体激活状态。在高通量药物筛选中,经常遇到这些难题:Gi受体cAMP信号微弱测不准;Gs强激活受体cAMP爆表超出试剂盒线性范围;不同细胞培养基带来基质干扰,数据波动大;批间差异大导致实验难以重复。
针对不同GPCR筛选痛点,我们推出THUNDER™ cAMP TR‑FRET Kit(常规灵敏度版)与UniOne® TR‑FRET cAMP HiRange Kit(超宽量程版)两套均相免洗TR‑FRET试剂盒,基于竞争型时间分辨荧光技术,一站式覆盖从Gi弱激活到Gs强激活的各类GPCR研究需求。
检测原理:竞争法TR‑FRET均相检测 试剂盒采用竞争免疫检测模式,细胞裂解产生的内源游离cAMP,会与生物素标记cAMP示踪剂竞争结合受体标记抗‑cAMP抗体。胞内cAMP浓度越高
TR‑FRET信号越低,信号比值665 nm/615 nm用于定量cAMP浓度;全程“加样‑孵育‑读数”,无需洗板,规避洗板引入的人为误差,完美适配96/384孔高通量筛选场景。
THUNDER™ cAMP TR‑FRET Kit|高灵敏度,捕捉微弱cAMP信号
核心优势
1,快速简便:细胞给药后仅需1h孵育即可读数,均相免洗,大幅压缩筛选周期;
2,受体兼容性广:经过内源、重组GPCR细胞充分验证,Gs、Gi型受体均可使用;
3,优秀批次间稳定性:每批次试剂盒都会与历史批次做平行对照,保障信号窗口、灵敏度、标准曲线批次间高度一致,规避因试剂盒批次造成数据不可重复的风险。
UniOne® TR‑FRET cAMP HiRange Kit|超宽动态范围,无惧高浓度cAMP
核心优势
1,更宽线性区间:线性范围拓展至5‑3333 nM,覆盖cAMP从低到高的跨度,无需多次稀释样本,减少操作与稀释引入误差;
2,抗基质干扰能力强:在缓冲液、RPMI‑1640、DMEM三种常用实验基质下,信噪比S/B全面对标竞品,IC50更低,受培养基基质抑制更小;
3,定量性能经过加标回收验证:高、中、低cAMP浓度加标回收实验,回收率89%‑128%,CV大多低于9%,证明在复杂细胞裂解样本中,定量准确度与精密度可靠。
性能优异,无惧对比
①细胞水平药理对标
选用内源表达A2a腺苷受体的U266B1细胞,拮抗剂ZM 241385开展药效验证。
对比实验数据表明:THUNDER™ cAMP 检测试剂盒与竞品试剂盒相比,受体药理表现相当,但该细胞模型下检测信号窗口略低。
实测数据:THUNDER™ IC50=445.6 pM;竞品IC50=590.6 pM,二者抑制曲线高度重合,药理评价结果保持一致,完全满足GPCR拮抗剂药效筛选需求。
②培养基基质效应对比
血清、培养基添加物极易产生基质干扰,缓冲液中表现优秀的试剂盒,放到真实细胞培养基中性能往往大幅衰减。 我们选取
DMEM、RPMI‑1640 两种主流细胞培养基,与海外竞品、国内竞品做平行比对:
DMEM培养基(大量GPCR细胞常用):THUNDER™ S/B可达9,优于海外竞品12.3、国内竞品9.9;检测下限低至0.1 nM,抗基质干扰能力突出;线性范围0.1‑300 nM
RPMI‑1640培养基:三款试剂盒性能整体处于同一水平,海外竞品信噪比略占优势,本试剂盒依旧可以输出合格标准c。
重点提示:试剂盒在单纯细胞模型中信号窗口略低,但在DMEM真实培养基环境下信噪比反超竞品,更贴合客户实际药物筛选实验条件。
UniOne® cAMP HiRange 试剂盒抗培养基基质干扰更强,信噪比更高、IC50 漂移小、线性范围更广,细胞样本可直接检测,保障GPCR筛选数据稳定。
UniOne® cAMP HiRange 试剂盒在缓冲液、DMEM、RPMI‑1640三种基质中,高、中、低浓度样本回收率89‑128%且CV<10%,定量准确重复性好,具备优异抗基质干扰能力,可直接对细胞样本开展cAMP定量检测。
试剂盒选型指南,不再选错试剂盒
THUNDER cAMP灵敏度优异,适合低丰度cAMP检测;UniOne cAMP HiRange量程更宽,抗培养基干扰强,细胞样本可直接定量,两套方案覆盖GPCR不同激活强度的筛选。
从Gi受体微弱信号捕捉,到Gs受体超高cAMP样本定量,THUNDER™与UniOne® cAMP试剂盒形成完整组合方案,匹配您不同GPCR药物筛选需求,助力GPCR新药研发少走弯路。
本产品仅供科研使用,不可用于临床诊断。
相关产品推荐
TR-FRET 第二信使检测试剂盒及耗材
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| Thunder™ cAMP TR FRET Assay Kit |
KIT-CAMP-1000 |
1000T |
| UniOne® TR-FRET cAMP HiRange Assay kit |
UA086053 |
500T |
| UniOne® TR-FRET Human cGMP Detection Kit |
UA086127 |
500T |
| 微孔板(96 孔板,白色,浅孔) |
abs7308 |
1 箱 |
| 微孔板(384 孔板,白色,浅孔) |
abs7311 |
1 箱 |
磷酸化蛋白检测(TR-FRET 法)产品名称货号规格
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| THUNDER™ Phospho-ERK1/2 (T202/Y204) TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
KIT-ERKP-500 |
500 points |
| THUNDER™ Phospho-MEK1 (S218/S222) TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
KIT-MEK1P-500 |
500 points |
| THUNDER™ Phospho-AKT pan (T308) TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
KIT-AKTT308P-500 |
500 points |
UniOne® PPI/RIPTAC/PROTAC 试剂盒
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| UniOne® TR-FRET Human NEK7/NLRP3 Binding Kit |
UA086135 |
500T |
| UniOne® TR-FRET Human KRAS[G12D]/CypA Ternary Binding Kit |
UA086153 |
500T |
| UniOne® TR-FRET Human BRD4/AR RIPTAC Binding Kit |
UA086148 |
500T |