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文献解析|Ki-67:细胞增殖的神奇标记

194 人阅读发布时间:2025-02-17 14:19

Ki-67

自Gerdes等人在1983年首次发现人Ki-67抗原以来,这一分子便迅速成为临床肿瘤学中评估预后和预测疗效的关键参数。Ki-67作为核仁rRNA合成的核心因子,其表达强度与细胞进入S期(即DNA合成期)的紧密关联,使得它成为衡量细胞增殖活性的重要指标。

尽管Ki-67在组织病理诊断中得到了广泛应用,但在血液系统恶性肿瘤的流式细胞术分析中,其应用却相对有限。这主要归因于骨髓细胞群体的高度异质性,以及过去技术手段的限制。使用传统的单色或双色流式细胞术,仅能检测到总骨髓细胞群的Ki-67表达情况,而无法对不同细胞谱系进行精确区分。此外,血液肿瘤的免疫分型研究中往往忽视了Ki-67的重要性,这也限制了其在该领域的应用。

技术资料图片1

为了克服这些挑战,Kelly P.H. Nies等人采用了先进的多色流式细胞术技术,对骨髓中不同细胞群体的Ki-67表达水平进行了深入细致的分析。他们的研究方案涵盖了粒系、单核系分化各阶段、干祖细胞、B系前体以及红系分化各阶段的Ki-67表达情况,旨在更全面地揭示Ki-67在血液系统恶性肿瘤中的表达特征及其潜在的临床意义。

Tubes Antigen Clone Fluorochrome Ab Volume (μℓ)
1 Non-relevant IgG VI-AP FITC 5
CD13 Immu103.44 PE-Cy 5.5 5
CD34 581 Pe-Cy7 5
HLA-Dr Immu-357 PB 5
CD45 J.33 KO 2
2 Ki-67 MIB-1 FITC 5
CD14 RMO52 r-PE 5
CD64 22 ECD 2
CD13 Immu103.44 PE-Cy 5.5 5
CD34 581 Pe-Cy7 5
CD16 3G8 APC 1
CD10 ALB1 APC-A700 3
CD11b Bear1 APC-A750 1
HLA-Dr Immu-357 PB 5
CD45 J.33 KO 2
3 Ki-67 MIB-1 FITC 5
CD105 1G2 r-PE 10
CD123 SSDCLy107D2 ECD 5
CD13 Immu103.44 PE-Cy 5.5 5
CD117 104D2D1 Pe-Cy7 5
CD71 YDJ1.2.2 APC-A700 1
CD235a 11EUB-7-6 APC-A750 5
HLA-Dr Immu-357 PB 5
CD45 J.33 KO 2
4 Ki-67 MIB-1 FITC 5
CD13 Immu103.44 PE-Cy 5.5 5
CD117 104D2D1 Pe-Cy7 5
CD36 CB38 APC 5
HLA-Dr Immu-357 PB 5
CD45 J.33 KO 2

 

  1. 第一管:阴性对照
    • 目的:设立阴性对照,用于确定各系同型对照的阴性表达范围,为后续分析提供设门参考。
    • 标记物:使用CD13、CD34、HLA-DR和CD45等抗体,分别标记粒系、干祖细胞、单核系及总白细胞群,同时加入各系的同型对照抗体。
  2. 第二管:粒系与单核系Ki-67表达分析
    • 目的:分析粒系和单核系在不同分化阶段中Ki-67的表达情况。
    • 标记物:除包含第一管中的部分标记物外,还需加入特异性识别Ki-67的抗体,以评估各分化阶段的增殖活性。
  3. 第三、四管:红系Ki-67表达分析
    • 目的:详细分析红系分化各阶段中Ki-67的表达,探讨其在红细胞生成过程中的作用。
    • 标记物:根据红系分化的特点,选择合适的标记物(如GPA、CD71等)与Ki-67抗体组合使用,以区分不同分化阶段并评估增殖活性。

设门方法与检测结果示例:粒系与单核系分化及Ki-67表达分析,红系分化及其Ki-67表达,D图是浆细胞Ki-67表达:

技术资料图片2

CD34+干祖细胞与B系前体细胞Ki-67表达检测结果描述:

技术资料图片3

50例样本Ki-67表达统计结果的Box图描述

技术资料图片4

 

名称 货号 规格
Ki-67 (8D5) Mouse mAb 9449T 20ul
PE-Cy7 Mouse anti-Ki-67(B56) 561283 50Tst
Purified Mouse Anti-Ki-67(B56) 550609 1mL
Ki67 (Ki-67) sc-23900 200ug/ml
资料格式:

8a4ed4b243224e4ba46613f7a7fcfcf9.png

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