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线粒体分离试剂盒—磁珠的方法

1530 人阅读发布时间:2011-04-29 11:00

说到线粒体分离,首先想到的肯定是差速离心,教科书上也是这样教的。不过此法颇为麻烦,匀浆再加上一次又一次的离心,得率还不见得高。要是有个试剂盒就好了,可惜市场上线粒体分离的试剂盒不多,最近,美天旎推出了一个。
美天旎的线粒体分离试剂盒是适用于人的。它的独特之处在于,它是使用磁珠,也就是响当当的MACS技术来纯化的,纯度更高,更快速,2个小时之内就能从人的细胞或组织中分离到完整的线粒体。
整个过程如下图:                        

 

  1. 裂解细胞。
  2. 用Anti-TOM22磁珠来标记线粒体外膜转位酶22(TOM22)。
  3. 将标记的细胞裂解液上样到MACS柱中,MACS柱置于MACS分选器中。洗涤杂质,洗涤过程中磁性标记的线粒体保留在柱中。

将柱从分选器中移走,洗脱线粒体。于是就得到了高纯、完整的线粒体。
 新闻图片1      

此试剂盒与传统方法,比如差速离心或密度梯度离心相比,产量和纯度都更高。纯化到的线粒体中不会带有其他细胞器的污染,如内质网或细胞核。而且,MACS技术对细胞和细胞器特别温和,因此分离得到的线粒体保持了完整性,这样在下游的功能分析中能获得更可靠、重复性更好的数据。
另外,美天旎在8月还推出了多个新产品,包括全血CD33微珠(人),能从全血或骨髓中直接分选CD33+ 细胞;抗小鼠CD127抗体系列,有纯抗体、PE标记和生物素标记三种,能检测CD127阳性的细胞,如效应记忆T细胞。纯抗体可用于体外或体内,阻止IL-17结合到其受体上。细胞培养基也添了一个新成员—神经培养基,适用于人、小鼠和大鼠。这是一种无血清培养基,为分选后神经细胞的生长和长期培养而优化 .                           

                    

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