罗工流式秘籍22 ：可以用流式进行多因子定量检测啦

Q：哎呀，师姐，我最近流式的T细胞分型都做的差不多了，但是还想测下白介素那几个细胞因子的浓度去侧面反应下情况，可是我想到Elisa的操作，我就觉得好麻烦啊，简直头大。

A：你那么多个因子为啥不一起检测呢？我最近了解了一个实验方法叫CBA，可以多个指标同时上流式检测，上完机用软件分析一下结果就出来了，挺简单的。

Q：啊，这么优秀？师姐你给我讲下呢

A：优宁维有相关的讲座视频，（插入视频？）来我们一起看一下这个方法具体怎么说的。

流式多因子检测以携带不同荧光强度的微球为载体，同时对微量、液相样本中多种可溶性蛋白成分进行定量分析的流式检测方法，简称CBA。

其原理跟ELISA相似，也是双抗夹心，不过把包被好捕获抗体的96孔板替换为了包被了荧光素和抗体的微球，如下图所示：

虽然原理相似，但是CBA在定性定量的基础之上，可以通过微球上包被的荧光素强度不同来实现多个因子同时检测。

Q：哇师姐，看起来不错哦，我这么多细胞因子要是用CBA一起检测应该很快就可以做完了，这是我做的笔记，你帮我看看这个步骤有什么问题没呀

• 制作标准品，准备待检测物

• 混合捕获微球

• 待检测物与捕获微球共孵育

• PE检测抗体孵育

• 避光孵育3H

• 流式细胞仪上机检测

• CBA分析软件（FCAP）批量数据分析

A: 嗯，没什么问题，看起来整个CBA的实验流程做下来就4H左右，大大节约了我们的时间哇。

对比起来，CBA的优势还是很明显的：

• 质量优秀：稳定性高、准确性好、灵敏度高

• 单管多指标：单个标本可同时检测多个指标，样本需要量大大少于ELISA方法

• 实验时间短：单次实验时间（<4h）较单次ELISA所需时间短，且操作简便

• 自动化定量：每个因子独立标准曲线，软件自动分析结果

• 不用做复孔：每种因子收至少300个beads,就相当于重复300次

也有好多文献都用了这个方法呢，看起来挺靠谱，要不我们买个试试？找小优问问去

小优：我们的CBA Kit有很多热卖产品，你们可以看一下：

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另外，CBA的分析也很简单，我们B站上有相关的教程（附链接），10分钟教会你~
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